Определение количества гемоглобина проводится методом колориметрии по Сали, когда сравнивают интенсивность окраски образца крови пациента и теста. Более усовершенствованный способ – гемихромный, для него не нужны реактивы с цианистым калием.
Большая точность у спектрофотометрии, она предусматривает облучение светом сыворотки крови после добавления реактивов. Прибор фиксирует непоглощенную часть, на таком же принципе работают портативные гемоглобинометры.
Исследование необходимо для выявления анемии (низких показателей), чаще всего она возникает при нехватке железа, но возможно и поражение костного мозга, разрушение эритроцитов. Повышенное количество гемоглобина тоже опасно, так как в густой крови чаще образуются тромбы, закупоривающие сосуды. Высокий гемоглобин может указывать на хронические заболевания сердца, легких, выраженное обезвоживание.
📌 Содержание статьи
Принцип определение количества гемоглобина
Количество гемоглобина в крови определяется двумя способами – спектрофотометрия (точный, но дорогой) и колориметрия (более простой). Второй вариант в лабораториях выполняется при помощи трех разных методик:
- гемиглобинцианидная,
- гемихромная,
- гемиглобиназидная.
Вне зависимости от способа измеряется гемоглобин в крови в г/л.
Гемоглобин может менять свою структуру, окисляться и превращаться в метгемоглобин, тогда обычная методика определения не подходит. Для этого нужно провести количественную фотометрию по цианидному методу Эвелин-Маллой. Он основан на способности связывания гемоглобина с цианидами и превращения в цианогемоглобин. Окисленный не вступает в эту реакцию.
Поэтому будет разница в результате между обычной формой и метгемоглобином. По ней и рассчитывают концентрацию.
Есть более современный анализ, когда сразу можно найти все формы гемоглобина – нормальный, окисленный и связанный с углекислотой. Он отличается высокой точностью, но такие приборы есть только в крупных диагностических центрах.
Что представляет собой гемометр Сали
Гемометр Сали – это пробирка с запаянным отверстием. Она заполняется раствором солянокислого гематина, образующимся из гемоглобина и соляной кислоты.
Концентрация в стандартном растворе известна (167 г/л). При проведении анализа крови к сыворотке добавляют столько реактива, чтобы цвет образца и теста сравнялся. Потом измеряют соотношение объемов и вычисляют уровень гемоглобина. Такой метод считается устаревшим, он крайне редко используется в лабораторной практике. Достоверность анализа не превышает 70%.
Цианметгемоглобиновый метод определения гемоглобина в крови
Один из наиболее точных методов определения гемоглобина в крови – это цианметгемоглобиновый. Он заключается в добавлении к сыворотке крови раствора Добкина, содержащего железосинеродистый и цианистый калий, соду. Гемоглобин при этом переходит в метгемоглобин, а потом в цианметгемоглобин. Затем пробирка помещается в спектрофотометр и ее освещают светом. По непоглощенной части измеряют оптическую плотность и переводят показатель в уровень гемоглобина. Этот же принцип определения используется и при автоматических замерах при помощи портативного гемоглобинометра.
Клиническое значение гемоглобина
Клиническое значение гемоглобина состоит в переносе кислорода от легких крови, а при его снижении (анемии) этот процесс нарушается. При кислородном голодании в клетках уменьшается образование энергии. Это нарушает работу всех органов и систем, но сильнее всего страдает головной мозг и сердечная мышца.
Пациенты ощущают слабость, быструю утомляемость, одышку и сердцебиение при обычной физической активности. При тяжелой форме появляется головокружение, обморочные состояния, постоянная сонливость, ухудшение памяти, потеря работоспособности.
Анемия бывает при кровотечении, нарушении всасывания железа и витаминов, повышенном расходе при инфекции, хроническом воспалении. Реже причиной становится гемолиз (ускоренное разрушение) эритроцитов, недостаточное образование красных клеток в костном мозге.
Резкое уменьшение с потерей веса дает основание заподозрить опухоль. Возможно состояние, когда гемоглобин в норме, но из-за изменения структуры белок теряет способность переносить кислород. Это бывает при отравлении углекислым газом, окисью азота, наследственных болезнях, применении медикаментов.
Высокие показатели гемоглобина опасны повышенной густотой крови, тромбозом сосудов. Они указывают на хронические болезни легких, сердечную недостаточность, обезвоживание, непроходимость кишечника. Возможно и усиленное, бесконтрольное образование эритроцитов в костном мозге (полицитемия). Это заболевание относится к опухоли крови.
Гемихромный метод определения гемоглобина
Гемихромный метод для определения гемоглобина в крови считается более усовершенствованным, чем по Сали, так как в составе реактива нет цианидов. Суть этого способа заключается в образовании из всех гемоглобиновых фракций одной формы – гемихрома. Достоинствами методики считают:
- быстроту проведения,
- высокую точность,
- широкий диапазон измерений,
- устойчивость и безопасность реактивов.
Сколько составляет нормальная концентрация гемоглобина в крови
Самая высокая нормальная концентрация гемоглобина в крови у новорожденного, она составляет 135-210 г/л, а у недоношенных на 5-10 единиц ниже. Потом показатель постепенно снижается, к 7 годам он составляет 110-150 г/л. У здорового взрослого мужчины уровень находится в пределах 130-160 г/л.
Вне беременности у женщины должно быть 120-140 г/л белка эритроцитов, а при вынашивании ребенка нижняя граница на 10 единиц меньше. Интересной особенностью является уменьшение уровня гемоглобина в крови на 10-12% с 17 часов до 7 утра. Он немного меньше (на 5-7 единиц) после приема пищи. Показатель на 6% ниже, если кровь брать в положении лежа по сравнению с сидячим.
Определение количества гемоглобина проводится методом колориметрии и спектрофотометрии. Исследование нужно для выявления анемии или повышенных показателей. При подозрении на наличие окисленного белка метгемоглобина нужны особые способы проведения анализа.
